體外誘導人骨髓間充質干細胞向血管平滑肌細胞分化
來源：醫(yī)學空間
中國研究者應用血小板衍生生長因子BB（platelet-derived growthfactor BB,PDGF-BB）,體外誘導人骨髓間充質干細胞（human bone marrowmesenchymal stemcells,hBMSCs）向血管平滑肌細胞表型分化,探討該方法的可行性及誘導細胞作為組織工程血管平滑肌種子細胞的可行性。
研究者抽取健康成人志愿者骨髓,經密度梯度離心分離得單個核細胞,PDGF-BB（20ng/ml）誘導hBMSCs向血管平滑肌樣細胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）分化,觀察細胞形態(tài)變化。免疫熒光檢測細胞內血管平滑肌肌動蛋白α（vascular smooth muscleα-actin,SMα-actin）,血管平滑肌鈣結合蛋白（vascular smoothmuscle calponin,SMcalponin）,血管平滑肌肌球蛋白重鏈（vascular smooth muscle myosin heavy chain,SMMHC）和細胞血管平滑肌鈣結合相關蛋白（smooth muscle22α,SM22α）表達情況;反轉錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR）檢測誘導后血管平滑肌細胞SMα-actin,SMcalponin,SMMHC和SM22α的mRNA表達。Western印記檢測SM22α的表達。流式細胞分析技術（fluorescence activated cell sorter,FACS）分析誘導后細胞內SMα-actin,SMcalponin,SMMHC的表達。
結果發(fā)現(xiàn)PDGF-BB20ng/ml誘導后可見單層培養(yǎng)的細胞形態(tài)呈“成纖維細胞樣”。免疫熒光檢測示SMα-actin,SMcalponin,SMMHC,SM22α表達陽性;RT-PCR檢測SMα-actin,SMcalponin,SMMHC,SM22α的mRNA陽性表達。Western印跡檢測SM22α的表達為陽性。FACS分析表明誘導后,SMα-actin,SMcalponin,SMMHC表達均增高,與未誘導組比較差異有統(tǒng)計學意義（P〈0.05,n=3）。由此，研究者得出結論，人骨髓間充質干細胞在PDGF-BB的誘導下可向血管平滑肌細胞表型分化,有望成為血管組織工程血管平滑肌種子細胞的來源。
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